نحوه رشد باکتری در ظرف پتری: 10 مرحله

فهرست مطالب:

نحوه رشد باکتری در ظرف پتری: 10 مرحله
نحوه رشد باکتری در ظرف پتری: 10 مرحله

تصویری: نحوه رشد باکتری در ظرف پتری: 10 مرحله

تصویری: نحوه رشد باکتری در ظرف پتری: 10 مرحله
تصویری: آماده کردن محیط کشت (preparation of culture media ) 2024, مارس
Anonim

آیا تا به حال خواسته اید برای یک پروژه علمی یا فقط برای سرگرمی ، باکتری پرورش دهید؟ این به طرز شگفت انگیزی ساده است - تنها چیزی که شما نیاز دارید آگار (یک ماده مخصوص رشد ژلاتینی) ، یک سری ظروف استریل شده پتری و برخی منابع خوب باکتری های نفرت انگیز است!

مراحل

قسمت 1 از 3: آماده سازی ظروف پتری

مرحله 1 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 1 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 1. آگار را آماده کنید

آگار ماده ژلاتینی است که برای کشت باکتری ها استفاده می شود. این ماده از نوعی جلبک قرمز ساخته شده است که سطح رشد ایده آل را برای انواع مختلف باکتری ها فراهم می کند. برخی از انواع آگار حاوی مواد مغذی (مانند خون گوسفند) هستند که به رشد قوی تر باکتری ها کمک می کند.

  • ساده ترین نوع آگار برای استفاده در این آزمایش آگار است که به صورت پودر می آید. برای هر ظرف 4 اینچی پتری که می خواهید استفاده کنید به 1.2 گرم (حدود 1/2 قاشق چایخوری) پودر آگار نیاز دارید.
  • در یک ظرف یا کاسه ضد حرارت ، 1/2 قاشق چایخوری پودر آگار را در 60 میلی لیتر (تقریبا 1/4 فنجان) آب گرم مخلوط کنید. این مقادیر را در چند ظرف پتری که قصد استفاده دارید ضرب کنید.
  • کاسه یا بشقاب را در مایکروویو قرار دهید و یک دقیقه بجوشانید ، مراقب باشید تا مطمئن شوید محلول آگار سرریز نمی شود.
  • وقتی محلول آماده شد ، پودر آگار باید کاملاً حل شود و مایع شفاف باشد.
  • قبل از اقدام به محلول آگار اجازه دهید چند دقیقه سرد شود.
مرحله 2 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 2 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 2. ظروف پتری را آماده کنید

ظروف پتری ظروف کوچک با کف صاف ساخته شده از شیشه یا پلاستیک شفاف هستند. آنها دو نیمه دارند - بالا و پایین - که به هم می چسبند. این محتویات را در برابر هرگونه هوای ناخواسته آلوده محافظت می کند ، اما همچنین اجازه خروج گازهای تولید شده توسط باکتری را می دهد.

  • ظروف پتری قبل از استفاده برای رشد باکتریها باید کاملاً استریل شوند. در غیر این صورت ، نتایج آزمایش ممکن است تحت تأثیر قرار گیرد. ظروف پتری تازه خریداری شده باید از قبل استریل شده و در ظروف پلاستیکی بسته شوند.
  • ظرف پتری را از بسته بندی خارج کرده و دو نیمه را جدا کنید. محلول آگار داغ را با دقت در نیمه پایینی ظرف پتری بریزید - به اندازه ای که لایه ای در کف ظرف ایجاد شود.
  • به سرعت نيمه بالايي ظرف پتري را قرار دهيد تا از آلودگي باكتري هاي هوا به آزمايش جلوگيري شود. ظروف پتری را به مدت 30 دقیقه تا دو ساعت کنار بگذارید تا محلول آگار سرد و سفت شود (در صورت آماده شدن شبیه ژلاتین می شود).
مرحله 3 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 3 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 3. ظروف پتری را در یخچال بگذارید تا آماده استفاده شوند

اگر قصد ندارید بلافاصله از ظروف پتری پر از آگار استفاده کنید ، باید آنها را در یخچال نگهداری کنید تا زمانی که آماده انجام آزمایش باشید.

  • نگهداری ظروف پتری در یخچال از تبخیر آب داخل ظروف جلوگیری می کند (باکتری ها برای رشد به محیط مرطوب نیاز دارند). همچنین اجازه می دهد تا سطح آگار کمی سفت شود ، که از هرگونه شکستگی یا لق شدن هنگام انتقال نمونه های باکتری جلوگیری می کند.
  • هنگام نگهداری ظروف پتری در یخچال ، آنها را باید وارونه قرار دهید. این به جلوگیری از تشکیل تراکم روی کلاهک در افتادن در نمونه و ایجاد اختلال در سطح رشد کمک می کند.
  • ظروف پتری با آگار را می توانید تا دو ماه در یخچال نگهداری کنید. وقتی آماده استفاده از آنها هستید ، آنها را از یخچال خارج کرده و اجازه دهید قبل از معرفی نمونه های خود به دمای اتاق برسند.

قسمت 2 از 3: رشد باکتری ها

مرحله 4 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 4 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 1. باکتری ها را در ظروف پتری وارد کنید

هنگامی که محلول آگار سفت شد و ظروف پتری در دمای اتاق قرار گرفتند ، شما آماده قسمت سرگرم کننده - معرفی باکتری ها هستید. دو روش برای انجام این کار وجود دارد - از طریق تماس مستقیم یا از طریق جمع آوری نمونه.

  • تماس مستقیم:

    این زمانی است که باکتری ها با استفاده از تماس مستقیم یعنی لمس آگار به ظرف پتری منتقل می شوند. یکی از رایج ترین روش ها برای این کار این است که به سادگی نوک انگشت خود (قبل یا بعد از شستن دست) را به آرامی روی سطح آگار فشار دهید. با این حال ، می توانید ناخن انگشت یا سطح یک سکه قدیمی را روی آگار فشار دهید یا حتی یک موی کوچک یا یک قطره شیر را روی بشقاب بگذارید. از تخیلاتت استفاده کن!

  • مجموعه نمونه: با این روش می توانید تقریباً از هر سطحی باکتری ها را جمع آوری کرده و به ظرف پتری منتقل کنید. تنها چیزی که نیاز دارید سواب پنبه ای تمیز است. فقط یک سواب پنبه ای بردارید و روی هر سطحی که فکر می کنید بکنید - داخل دهان ، دستگیره در ، کلیدهای صفحه کلید رایانه یا دکمه های کنترل از راه دور - و سپس سطح آگار را خراش دهید (بدون پارگی آی تی). این مکان ها دارای باکتری های زیادی هستند و باید نتایج جالب (و نفرت انگیز) را در دو روز ارائه دهند.
  • در صورت تمایل ، می توانید بیش از یک نمونه باکتریایی را در هر ظرف پتری قرار دهید - تنها کاری که باید انجام دهید این است که ظرف را به چهار قسمت تقسیم کنید و یک نمونه باکتریایی متفاوت را در هر یک از آنها قرار دهید.
مرحله 5 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 5 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 2. ظروف پتری را برچسب گذاری و مهر کنید

پس از معرفی باکتری ها ، باید درب ظرف پتری را بگذارید و با مقداری نوار چسب بزنید.

  • حتماً بر روی هر ظرف پتری برچسب منبع باکتری های موجود را بنویسید. در غیر این صورت نمی توانید بگویید کدام کدام است. می توانید این کار را با استفاده از روبان و نشانگر انجام دهید.
  • به عنوان یک احتیاط اضافی ، می توانید هر ظرف پتری را در یک کیسه هوای بسته قرار دهید. این یک لایه محافظ اضافی در برابر کلنی های باکتریایی خطرناک ایجاد می کند ، اما همچنان به شما امکان می دهد محتویات ظرف پتری را مشاهده کنید.
مرحله 6 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 6 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 3. ظروف پتری را در یک مکان گرم و تاریک قرار دهید

ظروف پتری را در یک مکان گرم و تاریک قرار دهید ، جایی که باکتری ها می توانند برای چند روز بدون مزاحمت رشد کنند. به یاد داشته باشید که صفحات را به صورت وارونه ذخیره کنید تا رشد باکتری ها در هر قطره آب بدون مزاحمت باقی بماند.

  • دمای ایده آل برای رشد باکتری بین 70 تا 98 درجه فارنهایت (20 تا 37 درجه سانتی گراد) است. در صورت لزوم می توانید ظروف پتری را در مکان خنک تری قرار دهید ، اما باکتری ها بسیار کندتر رشد می کنند.
  • اجازه دهید باکتری ها به مدت 4 تا 6 روز رشد کنند زیرا این امر زمان کافی برای رشد کشت را فراهم می کند. هنگامی که باکتری ها شروع به رشد می کنند ، ممکن است متوجه بویی از صفحات شوید.
مرحله 7 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 7 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 4. نتایج خود را بنویسید

پس از چند روز ، متوجه انواع مختلفی از باکتری ها ، کپک ها و قارچ ها می شوید که در داخل هر ظرف پتری رشد می کنند.

  • از یک دفترچه یادداشت برای ثبت مشاهدات خود در مورد محتویات هر بشقاب استفاده کنید و شاید به این نتیجه برسید که بیشترین محلول باکتری در کدام مکانها وجود دارد.
  • داخل دهان شما بود؟ دسته در؟ دکمه های کنترل از راه دور؟ نتیجه ممکن است شما را شگفت زده کند!
  • در صورت تمایل ، می توانید رشد روزانه کلنی های باکتریایی را با استفاده از نشانگر نوک نمدی برای کشیدن یک دایره در اطراف هر مستعمره در پایین ظرف پتری اندازه گیری کنید. پس از چند روز ، شما باید مجموعه ای از حلقه های متحدالمرکز را در پایین هر ظرف داشته باشید.
مرحله 8 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 8 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 5. اثربخشی عوامل ضد باکتریایی را آزمایش کنید

یک تغییر جالب در این آزمایش ، معرفی یک عامل ضد باکتری (ضدعفونی کننده دست ، صابون و غیره) به ظرف پتری به منظور آزمایش اثربخشی آن است.

  • هنگامی که باکتری ها را به ظرف پتری معرفی کردید ، از یک سواب پنبه برای قرار دادن یک قطره کوچک ژل ضدعفونی کننده دست ، صابون ضدعفونی کننده یا سفید کننده در مرکز نمونه باکتری استفاده کنید ، سپس آزمایش را به صورت عادی ادامه دهید.
  • همانطور که باکتری ها در پلاک رشد می کنند ، باید یک حلقه یا "هاله" در اطراف محل قرار دادن عامل ضد باکتری مشاهده کنید که هیچ باکتری در حال رشد نیست. این منطقه به عنوان "منطقه مرگ" شناخته می شود.
  • می توان با مقایسه اندازه مناطق کشتار در هر ظرف پتری ، اثربخشی عوامل ضد باکتریایی مختلف را اندازه گیری کرد. هرچه منطقه کشت بزرگتر باشد ، عامل ضد باکتری موثرتر است.

قسمت 3 از 3: دفع ایمن باکتری ها

مرحله 9 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 9 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 1. اقدامات ایمنی مناسب را انجام دهید

قبل از دور انداختن ظروف پتری خود ، ابتدا باید اقدامات ایمنی مناسب را انجام دهید.

  • در حالی که اکثر باکتری هایی که رشد می کنید خطرناک نیستند ، کلنی های بزرگ باکتریایی می توانند بیشتر خطرناک باشند - بنابراین قبل از دفع با استفاده از سفید کننده باید آنها را از بین ببرید.
  • با پوشیدن دستکش لاستیکی از دستان خود در برابر سفید کننده ها محافظت کنید ، با عینک پلاستیکی از چشم های خود محافظت کنید و با پوشیدن پیش بند از لباس های خود محافظت کنید.
مرحله 10 رشد باکتری ها در ظرف پتری
مرحله 10 رشد باکتری ها در ظرف پتری

مرحله 2. سفیدکننده را داخل ظروف پتری بریزید

ظرف پتری را باز کنید و مقدار کمی سفید کننده را با دقت روی کلنی های باکتریایی بریزید و ظرف را روی سینک نگه دارید. این باعث از بین رفتن باکتری ها می شود.

  • بسیار مراقب باشید که مایع سفید کننده به پوست شما نرسد زیرا می تواند بسوزد.
  • سپس ظرف پتری ضدعفونی شده را در کیسه پلاستیکی محکم قرار دهید و کیسه را در سطل زباله بریزید.

نکات

سعی کنید از BDA به عنوان محیط رشد استفاده کنید. یک محیط دکستروز سیب زمینی را با جوشاندن 20 گرم سیب زمینی ، 4 گرم آگار و 2 گرم دکستروز در یک لیوان آماده کنید. این محلول را در ظرف پتری قرار دهید و بگذارید خشک شود. چند تکه پنبه استریل بردارید و هر جا بمالید (کنترل از راه دور ، دسته در ، لوله آب و …). روی ظرف پتری را با پلاستیک بپوشانید. بگذارید به مدت 24 ساعت در یک مکان گرم انکوبه شود. روز بعد ، ظرف پتری را بررسی کنید. شما باید بتوانید کلنی های باکتریایی را ببینید

اعلامیه ها

هرگز چیزی را که احتمال رشد باکتری های خطرناک (مایعات بدن) در بشقاب دارد قرار ندهید هرگز باید در ظرف پتری قرار داده شود). اگر بشقاب دوباره باز شود می تواند باعث بیماری جدی شود.

توصیه شده: